WS310.3-2016 word版 醫(yī)院消毒供應(yīng)中心 第三部分:清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測標準
醫(yī)院消毒供應(yīng)中心 第3部分：清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測標準
Central sterile supply department (CSSD)-Part 3：Surveillance standard for cleaning,disinfection and sterilization
WS310.3—2016
代替WS310.3—2009
2016-12-27 發(fā)布 2017-6-01實施
中華人民共和國國家衛(wèi)生和計劃生育委員會
前言
本部分4.2.1.3、4.2.2.2.1、4.4.1.7、4.4.4.3.2為推薦性條款，其余均為強制性條款。
根據(jù)《中華人民共和國傳染病防治法》和《醫(yī)院感染管理辦法》制定本標準。
WS310《醫(yī)院消毒供應(yīng)中心》是從診療器械相關(guān)醫(yī)院感染預(yù)防與控制的角度，對醫(yī)院消毒供應(yīng)中心 的管理、操作、監(jiān)測予以規(guī)范的標準，由以下三個部分組成：
——第1部分:管理規(guī)范；
——第2部分:清洗消毒及滅菌技術(shù)操作規(guī)范；
——第3部分:清洗消毒及滅菌效果監(jiān)測標準。
本部分為WS310的第3部分。
本部分按照GB/T 1.1—2009給出的規(guī)則起草。
本部分代替WS 310.3—2009。除編輯性修改外主要技術(shù)變化如下：
——在適用范圍中，刪除了“暫未實行消毒供應(yīng)工作集中管理的醫(yī)院，其手術(shù)部（室）的消毒供應(yīng)工 作應(yīng)執(zhí)行本標準”和“已采取污水集中處理的其他醫(yī)療機構(gòu)可參照使用”的要求；
——在規(guī)范性引用文件中，增加了 WS/T 367《醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》和GB/T 30690《小型壓力 蒸汽滅菌器滅菌效果監(jiān)測方法和評價要求》；
——調(diào)整術(shù)語和定義中的A。值和管腔器械至WS310.2;增加大修的定義（見3.4);
——修改了監(jiān)測材料、自制測試標準包的要求(見4.1.3);
——增加了對壓力蒸汽滅菌器溫度、壓力和時間的檢測要求[見4.1.5.b)];
——增加了對清洗質(zhì)量可定期進行定量檢測的要求(見4.2.1.3);
——增加了使用特定滅菌程序時對滅菌質(zhì)量監(jiān)測的要求（見4.4.1.6);增加了外來醫(yī)療器械、植人 物、硬質(zhì)容器、超大超重包首次滅菌進行滅菌參數(shù)和有效性測試的要求(見4.4.1.8);
——增加了對壓力蒸汽滅菌每年監(jiān)測溫度、壓力和時間等參數(shù)的要求（見4.4.2.1.2);
——增加了對采用信息系統(tǒng)手術(shù)器械包用后有關(guān)標識的要求[見5.4.C)];增加了定期對監(jiān)測資料 進行總結(jié)分析，持續(xù)改進的要求(見5.6);
——增加了附錄D過氧化氫低溫等離子滅菌的生物監(jiān)測方法和附錄E低溫蒸汽甲醛滅菌的生物 監(jiān)測方法。
本部分主要起草單位:北京大學(xué)第一醫(yī)院、國家衛(wèi)生計生委醫(yī)院管理研究所、北京協(xié)和醫(yī)院、中國疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康產(chǎn)品安全所、上海瑞金醫(yī)院、廣州市第一人民醫(yī)院、江蘇省南京市衛(wèi)生局、浙 江省疾病預(yù)防控制中心、解放軍總醫(yī)院、四川大學(xué)華西醫(yī)院、浙江大學(xué)邵逸夫醫(yī)院、北京大學(xué)第三醫(yī)院、 北京大學(xué)口腔醫(yī)院、泰達國際心血管病醫(yī)院、廣東省中山市小欖人民醫(yī)院、黑龍江疾病預(yù)防控制中心、北 京積水潭醫(yī)院、北京市衛(wèi)生監(jiān)督所、北京朝陽醫(yī)院。
本部分主要起草人:李六億、鞏玉秀、付強、任伍愛、張青、張流波、李新武、錢黎明、馮秀蘭、王易非、 張宇、周彬、么莉、黃靖雄、胡國慶、劉運喜、黃浩、王亞娟、袁曉寧、劉翠梅、趙云呈、姜華、林玲、陳輝、 裴紅生、李保華。
本部分所代替標準歷次版本發(fā)布情況為：
--- WS 310.3—2009。
1范圍
WS310的本部分規(guī)定了醫(yī)院消毒供應(yīng)中心（central sterilesupplydepartment，CSSD)消毒與滅菌 效果監(jiān)測的要求、方法、質(zhì)量控制過程的記錄與可追溯要求。
本部分適用于醫(yī)院和為醫(yī)院提供消毒滅菌服務(wù)的消毒服務(wù)機構(gòu)。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB 15982 醫(yī)院消毒衛(wèi)生標準
GB/T 20367醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌醫(yī)療保健機構(gòu)濕熱滅菌的確認和常規(guī)控制要求
GB/T 30690小型壓力蒸汽滅菌器滅菌效果監(jiān)測方法和評價要求
WS310.1醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第1部分:管理規(guī)范
WS310.2醫(yī)院消毒供應(yīng)中心第2部分:清洗消毒及滅菌技術(shù)操作規(guī)范
WS/T 367醫(yī)療機構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范
3術(shù)語和定義
WS310.1、WS310.2界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。
3 .1
對影響滅菌過程和結(jié)果的關(guān)鍵要素進行記錄，保存?zhèn)洳椋瑢崿F(xiàn)可追蹤。
3 .2
滅菌過程驗證裝置 process challenge device;PCD
對滅菌過程具有特定抗力的裝置，用于評價滅菌過程的有效性。
3 .3
清洗效果測試物
用于測試清洗效果的產(chǎn)品。
3.4
大修
超出該設(shè)備常規(guī)維護保養(yǎng)范圍，顯著影響該設(shè)備性能的維修操作。
示例1:壓力蒸汽滅菌器大修如更換真空泵、與腔體相連的閥門、大型供汽管道、控制系統(tǒng)等。 示例2:清洗消毒器大修如更換水泵、清洗劑供給系統(tǒng)、加熱系統(tǒng)、控制系統(tǒng)等。
3.5
小型蒸汽滅菌器 small steamsterilizer
體積小于60L的壓力蒸汽滅菌器。
3.6
專門用于處理立即使用物品的壓力蒸汽滅菌過程。
4.1.1應(yīng)專人負責(zé)質(zhì)量監(jiān)測工作。
4.1.2應(yīng)定期對醫(yī)用清洗劑、消毒劑、清洗用水、醫(yī)用潤滑劑、包裝材料等進行質(zhì)量檢查，檢查結(jié)果應(yīng)符 合WS310.1的要求。
4.1.3應(yīng)進行監(jiān)測材料衛(wèi)生安全評價報告及有效期等的檢查，檢查結(jié)果應(yīng)符合要求。自制測試標準包 應(yīng)符合WS/T 367的有關(guān)要求。
4.1.4應(yīng)遵循設(shè)備生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊對清洗消毒器、封口機、滅菌器定期進行預(yù)防性維 護與保養(yǎng)、日常清潔和檢查。
4.1.5應(yīng)按照以下要求進行設(shè)備的檢測：
a) 清洗消毒器應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊進行檢測；
b) 壓力蒸汽滅菌器應(yīng)每年對滅菌程序的溫度、壓力和時間進行檢測；
c) 壓力蒸汽滅菌器應(yīng)定期對壓力表和安全閥進行檢測；
d) 干熱滅菌器應(yīng)每年用多點溫度檢測儀對滅菌器各層內(nèi)、中、外各點的溫度進行檢測；
e) 低溫滅菌器應(yīng)每年定期遵循生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊進行檢測；
f) 封口機應(yīng)每年定期遵循生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊進行檢測。
4.2.1器械、器具和物品清洗質(zhì)量的監(jiān)測
在檢查包裝時進行，應(yīng)目測和（或）借助帶光源放大鏡檢查。清洗后的器械表面及其關(guān)節(jié)、齒牙應(yīng)光 潔，無血漬、污漬、水垢等殘留物質(zhì)和銹斑。
每月應(yīng)至少隨機抽查3個?5個待滅菌包內(nèi)全部物品的清洗質(zhì)量，檢查的內(nèi)容同日常監(jiān)測，并記錄 監(jiān)測結(jié)果。
可定期采用定量檢測的方法，對診療器械、器具和物品的清洗效果進行評價。
4.2.2清洗消毒器及其質(zhì)量的監(jiān)測 4.2.2.1日常監(jiān)測
應(yīng)每批次監(jiān)測清洗消毒器的物理參數(shù)及運轉(zhuǎn)情況，并記錄。
4.2.2.2 定期監(jiān)測
4.2.2.2.1對清洗消毒器的清洗效果可每年采用清洗效果測試物進行監(jiān)測。當(dāng)清洗物品或清洗程序發(fā)生改變時，也可采用清洗效果測試指示物進行清洗效果的監(jiān)測。
4.2.2.22清洗效果測試物的監(jiān)測方法應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊。
4.22.3注意事項
清洗消毒器新安裝、更新、大修、更換清洗劑、改變消毒參數(shù)或裝載方法等時，應(yīng)遵循生產(chǎn)廠家的使 用說明或指導(dǎo)手冊進行檢測，清洗消毒質(zhì)量檢測合格后，清洗消毒器方可使用。
4.3消毒質(zhì)量的監(jiān)測
4.3.1濕熱消毒
應(yīng)監(jiān)測、記錄每次消毒的溫度與時間或A。值。監(jiān)測結(jié)果應(yīng)符合WS310.2的要求。應(yīng)每年檢測清 洗消毒器的溫度、時間等主要性能參數(shù)。結(jié)果應(yīng)符合生產(chǎn)廠家的使用說明或指導(dǎo)手冊的要求。
4.3.2化學(xué)消毒
應(yīng)根據(jù)消毒劑的種類特點，定期監(jiān)測消毒劑的濃度、消毒時間和消毒時的溫度，并記錄，結(jié)果應(yīng)符合 該消毒劑的規(guī)定。
4.3.3消毒效果監(jiān)測
消毒后直接使用物品應(yīng)每季度進行監(jiān)測，監(jiān)測方法及監(jiān)測結(jié)果應(yīng)符合GB 15982的要求。每次檢 測3件?5件有代表性的物品。
4.4滅菌質(zhì)量的監(jiān)測
4.4.1原則
4.4.1.1對滅菌質(zhì)量采用物理監(jiān)測法、化學(xué)監(jiān)測法和生物監(jiān)測法進行，監(jiān)測結(jié)果應(yīng)符合本標準的要求。 4.4.1.2物理監(jiān)測不合格的滅菌物品不得發(fā)放，并應(yīng)分析原因進行改進，直至監(jiān)測結(jié)果符合要求。
4.4.1.3包外化學(xué)監(jiān)測不合格的滅菌物品不得發(fā)放，包內(nèi)化學(xué)監(jiān)測不合格的滅菌物品和濕包不得使用。 并應(yīng)分析原因進行改進，直至監(jiān)測結(jié)果符合要求。
4.4.1.4生物監(jiān)測不合格時，應(yīng)盡快召回上次生物監(jiān)測合格以來所有尚未使用的滅菌物品，重新處理; 并應(yīng)分析不合格的原因，改進后，生物監(jiān)測連續(xù)三次合格后方可使用。
4.4.1.5植人物的滅菌應(yīng)每批次進行生物監(jiān)測。生物監(jiān)測合格后，方可發(fā)放。
4.4.16使用特定的滅菌程序滅菌時，應(yīng)使用相應(yīng)的指示物進行監(jiān)測。
4.4.1.7按照滅菌裝載物品的種類，可選擇具有代表性的PCD進行滅菌效果的監(jiān)測。
4.4.1.8滅菌外來醫(yī)療器械、植人物、硬質(zhì)容器、超大超重包，應(yīng)遵循廠家提供的滅菌參數(shù)，首次滅菌時 對滅菌參數(shù)和有效性進行測試，并進行濕包檢查。
4.4.2壓力蒸汽滅菌的監(jiān)測
4.4.2.1物理監(jiān)測法
4.4.2.1.1日常監(jiān)測：每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測并記錄滅菌時的溫度、壓力和時間等滅菌參數(shù)。滅菌溫度波 動范圍在+ 3°C內(nèi)，時間滿足最低滅菌時間的要求，同時應(yīng)記錄所有臨界點的時間、溫度與壓力值，結(jié)果 應(yīng)符合滅菌的要求。
4.4.2.1.2定期監(jiān)測：應(yīng)每年用溫度壓力檢測儀監(jiān)測溫度、壓力和時間等參數(shù)，檢測儀探頭放置于最難 滅菌部位。
4.4.2.2化學(xué)監(jiān)測法
4.4.2.2.1應(yīng)進行包外、包內(nèi)化學(xué)指示物監(jiān)測。具體要求為滅菌包包外應(yīng)有化學(xué)指示物，高度危險性物 品包內(nèi)應(yīng)放置包內(nèi)化學(xué)指示物，置于最難滅菌的部位。如果透過包裝材料可直接觀察包內(nèi)化學(xué)指示物 的顏色變化，則不必放置包外化學(xué)指示物。根據(jù)化學(xué)指示物顏色或形態(tài)等變化，判定是否達到滅菌合格
要求。
4.4.2.2.2采用快速程序滅菌時，也應(yīng)進行化學(xué)監(jiān)測。直接將一片包內(nèi)化學(xué)指示物置于待滅菌物品旁 邊進行化學(xué)監(jiān)測。
4.4.2.3生物監(jiān)測法
4.4.2.3.1應(yīng)至少每周監(jiān)測一次，監(jiān)測方法遵循附錄A的要求。
4.4.2.3.2緊急情況滅菌植人物時，使用含第5類化學(xué)指示物的生物PCD進行監(jiān)測，化學(xué)指示物合格 可提前放行，生物監(jiān)測的結(jié)果應(yīng)及時通報使用部門。
4.4.2.3.3采用新的包裝材料和方法進行滅菌時應(yīng)進行生物監(jiān)測。
4.4.2.3.4小型壓力蒸汽滅菌器因一般無標準生物監(jiān)測包，應(yīng)選擇滅菌器常用的、有代表性的滅菌物品 制作生物測試包或生物PCD,置于滅菌器最難滅菌的部位，且滅菌器應(yīng)處于滿載狀態(tài)。生物測試包或 生物PCD應(yīng)側(cè)放，體積大時可平放。
4.4.2.3.5采用快速程序滅菌時，應(yīng)直接將一支生物指示物，置于空載的滅菌器內(nèi)，經(jīng)一個滅菌周期后 取出，規(guī)定條件下培養(yǎng)，觀察結(jié)果。
4.4.2.36生物監(jiān)測不合格時，應(yīng)遵循4.4.1.4的規(guī)定。
4.4.2.4 B-D 試驗
預(yù)真空（包括脈動真空）壓力蒸汽滅菌器應(yīng)每日開始滅菌運行前空載進行B-D測試，B-D測試合格 后，滅菌器方可使用。B-D測試失敗，應(yīng)及時查找原因進行改進，監(jiān)測合格后，滅菌器方可使用。小型壓 力蒸汽滅菌器的B-D試驗應(yīng)參照GB/T 30690。
4.4.25滅菌器新安裝、移位和大修后的監(jiān)測
應(yīng)進行物理監(jiān)測、化學(xué)監(jiān)測和生物監(jiān)測。物理監(jiān)測、化學(xué)監(jiān)測通過后，生物監(jiān)測應(yīng)空載連續(xù)監(jiān)測三 次，合格后滅菌器方可使用，監(jiān)測方法應(yīng)符合GB/T 20367的有關(guān)要求。對于小型壓力蒸汽滅菌器，生 物監(jiān)測應(yīng)滿載連續(xù)監(jiān)測三次，合格后滅菌器方可使用。預(yù)真空（包括脈動真空）壓力蒸汽滅菌器應(yīng)進行 B-D測試并重復(fù)三次，連續(xù)監(jiān)測合格后，滅菌器方可使用。
4.4.3 干熱滅菌的監(jiān)測
4.4.3.1物理監(jiān)測法：每滅菌批次應(yīng)進行物理監(jiān)測。監(jiān)測方法包括記錄溫度與持續(xù)時間。溫度在設(shè)定 時間內(nèi)均達到預(yù)置溫度，則物理監(jiān)測合格。
4.4.3.2化學(xué)監(jiān)測法：每一滅菌包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物，每一滅菌包內(nèi)應(yīng)使用包內(nèi)化學(xué)指示物，并 置于最難滅菌的部位。對于未打包的物品，應(yīng)使用一個或者多個包內(nèi)化學(xué)指示物，放在待滅菌物品附近 進行監(jiān)測。經(jīng)過一個滅菌周期后取出，據(jù)其顏色或形態(tài)的改變判斷是否達到滅菌要求。
4.4.3.3生物監(jiān)測法：應(yīng)每周監(jiān)測一次，監(jiān)測方法遵循附錄B的要求。
4.4.3.4新安裝、移位和大修后的監(jiān)測：應(yīng)進行物理監(jiān)測法、化學(xué)監(jiān)測法和生物監(jiān)測法監(jiān)測（重復(fù)三次），
監(jiān)測合格后，滅菌器方可使用。
4.4.4低溫滅菌的監(jiān)測 4.4.4.1 原則
低溫滅菌器新安裝、移位、大修、滅菌失敗、包裝材料或被滅菌物品改變，應(yīng)對滅菌效果進行重新評 價，包括采用物理監(jiān)測法、化學(xué)監(jiān)測法和生物監(jiān)測法進行監(jiān)測（重復(fù)三次），監(jiān)測合格后，滅菌器方可 使用。
4.4.42環(huán)氧乙烷滅菌的監(jiān)測
4.4.42.1物理監(jiān)測法：每次滅菌應(yīng)監(jiān)測并記錄滅菌時的溫度、壓力、時間和相對濕度等滅菌參數(shù)。滅 菌參數(shù)應(yīng)符合滅菌器的使用說明或操作手冊的要求。
4.4.42.2化學(xué)監(jiān)測法：每個滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物，作為滅菌過程的標志，每包內(nèi)最難 滅菌位置放置包內(nèi)化學(xué)指示物，通過觀察其顏色變化，判定其是否達到滅菌合格要求。
4.4.42.3生物監(jiān)測法：每滅菌批次應(yīng)進行生物監(jiān)測，監(jiān)測方法遵循附錄C的要求。
4.4.4.3過氧化氫低溫等離子滅菌的監(jiān)測
4.4.4.3.1物理監(jiān)測法：每次滅菌應(yīng)連續(xù)監(jiān)測并記錄每個滅菌周期的臨界參數(shù)如艙內(nèi)壓、溫度、等離子 體電源輸出功率和滅菌時間等滅菌參數(shù)。滅菌參數(shù)應(yīng)符合滅菌器的使用說明或操作手冊的要求。 4.4.4.32可對過氧化氫濃度進行監(jiān)測。
4.4.4.3.3化學(xué)監(jiān)測法：每個滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物，作為滅菌過程的標志；每包內(nèi)最難 滅菌位置應(yīng)放置包內(nèi)化學(xué)指示物，通過觀察其顏色變化，判定其是否達到滅菌合格要求。
4.443.4生物監(jiān)測法：每天使用時應(yīng)至少進行一次滅菌循環(huán)的生物監(jiān)測，監(jiān)測方法遵循附錄D的
要求。
4.4.4.4低溫蒸汽甲醛滅菌的監(jiān)測
4.4.4.4.1物理監(jiān)測法：每滅菌批次應(yīng)進行物理監(jiān)測。詳細記錄滅菌過程的參數(shù)，包括滅菌溫度、相對 濕度、壓力與時間。滅菌參數(shù)應(yīng)符合滅菌器的使用說明或操作手冊的要求。
4.4.4.4.2化學(xué)監(jiān)測法：每個滅菌物品包外應(yīng)使用包外化學(xué)指示物，作為滅菌過程的標志；每包內(nèi)最難 滅菌位置應(yīng)放置包內(nèi)化學(xué)指示物，通過觀察其顏色變化，判定其是否達到滅菌合格要求。
4.4.4.43生物監(jiān)測法：應(yīng)每周監(jiān)測一次，監(jiān)測方法遵循附錄E的要求。
4.4.4.5其他低溫滅菌方法的監(jiān)測要求及方法應(yīng)符合國家有關(guān)標準的規(guī)定。
5質(zhì)量控制過程的記錄與可追溯要求
5.1應(yīng)建立清洗、消毒、滅菌操作的過程記錄，內(nèi)容包括：
a) 應(yīng)留存清洗消毒器和滅菌器運行參數(shù)打印資料或記錄；
b) 應(yīng)記錄滅菌器每次運行情況，包括滅菌日期、滅菌器編號、批次號、裝載的主要物品、滅菌程序 號、主要運行參數(shù)、操作員簽名或代號，及滅菌質(zhì)量的監(jiān)測結(jié)果等，并存檔。
5.2應(yīng)對清洗、消毒、滅菌質(zhì)量的日常監(jiān)測和定期監(jiān)測進行記錄。
5.3記錄應(yīng)具有可追溯性，清洗、消毒監(jiān)測資料和記錄的保存期應(yīng)>6個月，滅菌質(zhì)量監(jiān)測資料和記錄 的保留期應(yīng)>3年。
5.4滅菌標識的要求如下：
a) 滅菌包外應(yīng)有標識，內(nèi)容包括物品名稱、檢查打包者姓名或代號、滅菌器編號、批次號、滅菌曰 期和失效日期；或含有上述內(nèi)容的信息標識。
b) 使用者應(yīng)檢查并確認包內(nèi)化學(xué)指示物是否合格、器械干燥、潔凈等，合格方可使用。同時將手 術(shù)器械包的包外標識留存或記錄于手術(shù)護理記錄單上。
c) 如采用信息系統(tǒng)，手術(shù)器械包的標識使用后應(yīng)隨器械回到CSSD進行追溯記錄。
5.5應(yīng)建立持續(xù)質(zhì)量改進制度及措施，發(fā)現(xiàn)問題及時處理，并應(yīng)建立滅菌物品召回制度如下：
a) 生物監(jiān)測不合格時，應(yīng)通知使用部門停止使用，并召回上次監(jiān)測合格以來尚未使用的所有滅菌 物品。同時應(yīng)書面報告相關(guān)管理部門，說明召回的原因。
b) 相關(guān)管理部門應(yīng)通知使用部門對已使用該期間無菌物品的患者進行密切觀察。
c) 應(yīng)檢查滅菌過程的各個環(huán)節(jié)，查找滅菌失敗的可能原因，并采取相應(yīng)的改進措施后，重新進行 生物監(jiān)測3次，合格后該滅菌器方可正常使用。
d) 應(yīng)對該事件的處理情況進行總結(jié)，并向相關(guān)管理部門匯報。
5.6應(yīng)定期對監(jiān)測資料進行總結(jié)分析，做到持續(xù)質(zhì)量改進。
按照WS/T 367的規(guī)定，將嗜熱脂肪桿菌芽孢生物指示物置于標準測試包的中心部位，生物指示物 應(yīng)符合國家相關(guān)管理要求。標準測試包由16條41cmX66cm的全棉手術(shù)巾制成，即每條手術(shù)巾的長 邊先折成3層，短邊折成2層，然后疊放，制成23cmX23cmX15cm、1.5kg的標準測試包。
A.2監(jiān)測方法
按照WS/T 367的規(guī)定，將標準生物測試包或生物PCD(含一次性標準生物測試包），對滿載滅菌 器的滅菌質(zhì)量進行生物監(jiān)測。標準生物監(jiān)測包或生物PCD置于滅菌器排氣口的上方或生產(chǎn)廠家建議 的滅菌器內(nèi)最難滅菌的部位，經(jīng)過一個滅菌周期后，自含式生物指示物遵循產(chǎn)品說明書進行培養(yǎng)；如使 用芽孢菌片，應(yīng)在無菌條件下將芽孢菌片接種到含1〇mL溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基的無菌試管 中，經(jīng)56°C±2°C培養(yǎng)7d，檢測時以培養(yǎng)基作為陰性對照（自含式生物指示物不用設(shè)陰性對照），以加 人芽孢菌片的培養(yǎng)基作為陽性對照；見察培養(yǎng)結(jié)果。如果一天內(nèi)進行多次生物監(jiān)測，且生物指示物為同 一批號，則只需設(shè)一次陽性對照。
A.3結(jié)果判定
陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，試驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽性對照組培養(yǎng) 陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，試驗組培養(yǎng)陽性，則滅菌不合格；同時應(yīng)進一步鑒定試驗組陽性的細菌是否 為指示菌或是污染所致。
按照WS/T 367的規(guī)定，將枯草桿菌黑色變種芽孢菌片裝人無菌試管內(nèi)（1片/管），制成標準生物 測試管。生物指示物應(yīng)符合國家相關(guān)管理要求。
B.2監(jiān)測方法
將標準生物測試管置于滅菌器與每層門把手對角線內(nèi)、外角處，每個位置放置2個標準生物測試 管，試管帽置于試管旁，關(guān)好柜門，經(jīng)一個滅菌周期后，待溫度降至80 °C左右時，加蓋試管帽后取出試 管。在無菌條件下，每管加人5mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（TSB)，36°C±1°C培養(yǎng)48h，觀察初步 結(jié)果，無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)至第7日。檢測時以培養(yǎng)基作為陰性對照，以加人芽孢菌片的培養(yǎng)基作為陽 性對照。
B.3結(jié)果判定
陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，若每個測試管的肉湯培養(yǎng)均澄清，判為滅菌合格；若陽 性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，而只要有一個測試管的肉湯培養(yǎng)混濁，判為不合格；對難以判 定的測試管肉湯培養(yǎng)結(jié)果，取0.1mL肉湯培養(yǎng)物接種于營養(yǎng)瓊脂平板，用滅菌L棒或接種環(huán)涂勻，置 36C±1C培養(yǎng)48h，觀察菌落形態(tài)，并做涂片染色鏡檢，判斷是否有指示菌生長，若有指示菌生長，判 為滅菌不合格；若無指示菌生長，判為滅菌合格。
取一個20mL無菌注射器，去掉針頭，拔出針栓，將枯草桿菌黑色變種芽孢生物指示物放人針筒 內(nèi)，帶孔的塑料帽應(yīng)朝向針頭處，再將注射器的針栓插回針筒（注意不要碰及生物指示物），之后用一條 全棉小毛巾兩層包裹，置于紙塑包裝袋中，封裝。生物指示物應(yīng)符合國家相關(guān)管理要求。
C.2監(jiān)測方法
將常規(guī)生物測試包置于滅菌器最難滅菌的部位(所有裝載滅菌包的中心部位）。滅菌周期完成后應(yīng) 立即將生物測試包從被滅菌物品中取出。自含式生物指示物遵循產(chǎn)品說明書進行培養(yǎng)；如使用芽孢菌 片的，應(yīng)在無菌條件下將芽孢菌片接種到含5mL胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（TSB)的無菌試管中， 36°C±1°C培養(yǎng)48h，觀察初步結(jié)果，無菌生長管繼續(xù)培養(yǎng)至第7日。檢測時以培養(yǎng)基作為陰性對照 (自含式生物指示物不用設(shè)陰性對照），以加人芽孢菌片的培養(yǎng)基作為陽性對照。
C.3結(jié)果判定
陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，試驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽性對照組培養(yǎng) 陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，試驗組培養(yǎng)陽性，則滅菌不合格；同時應(yīng)進一步鑒定試驗組陽性的細菌是否 為指示菌或是污染所致。
采用嗜熱脂肪桿菌芽孢生物指示物制作管腔生物PCD或非管腔生物監(jiān)測包;生物指示物的載體應(yīng) 對過氧化氫無吸附作用，每一載體上的菌量應(yīng)達到1X106CFU，所用芽孢對過氧化氫氣體的抗力應(yīng)穩(wěn) 定并鑒定合格;所用產(chǎn)品應(yīng)符合國家相關(guān)管理要求。
D.2管腔生物PCD的監(jiān)測方法
滅菌管腔器械時，可使用管腔生物PCD進行監(jiān)測，應(yīng)將管腔生物PCD放置于滅菌器內(nèi)最難滅菌的 部位（按照生產(chǎn)廠家說明書建議，遠離過氧化氫注人口，如滅菌艙下層器械擱架的后方）。滅菌周期完成 后立即將管腔生物PCD從滅菌器中取出，生物指示物應(yīng)放置56 °C±2 °C培養(yǎng)7d(或遵循產(chǎn)品說明 書），觀察培養(yǎng)結(jié)果。并設(shè)陽性對照和陰性對照（自含式生物指示物不用設(shè)陰性對照）。
滅菌非管腔器械時，應(yīng)使用非管腔生物監(jiān)測包進行監(jiān)測，應(yīng)將生物指示物置于特衛(wèi)強材料的包裝袋 內(nèi)，密封式包裝后，放置于滅菌器內(nèi)最難滅菌的部位（按照生產(chǎn)廠家說明書建議，遠離過氧化氫注人口， 如滅菌艙下層器械擱架的后方）。滅菌周期完成后立即將非管腔生物監(jiān)測包從滅菌器中取出，生物指示 物應(yīng)放置56C±2C培養(yǎng)7d(或遵循產(chǎn)品說明書），觀察培養(yǎng)結(jié)果。并設(shè)陽性對照和陰性對照（自含式 生物指示物不用設(shè)陰性對照）。
D.4結(jié)果判定
陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，實驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽性對照組培養(yǎng) 陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，實驗組培養(yǎng)陽性，判定為滅菌失敗；同時應(yīng)進一步鑒定實驗組陽性的細菌是 否為指示菌或是污染所致。
采用嗜熱脂肪桿菌芽孢生物指示物制作管腔生物PCD或非管腔生物監(jiān)測包;生物指示物的載體應(yīng) 對甲醛無吸附作用，每一載體上的菌量應(yīng)達到1X106CFU，所用芽孢對甲醛的抗力應(yīng)穩(wěn)定并鑒定合格， 所用產(chǎn)品應(yīng)符合國家相關(guān)管理要求。
E.2管腔生物PCD的監(jiān)測方法
滅菌管腔器械時，可使用管腔生物PCD進行監(jiān)測，應(yīng)將管腔生物PCD放置于滅菌器內(nèi)最難滅菌的 部位（按照生產(chǎn)廠家說明書建議，遠離甲醛注人口），滅菌周期完成后立即將管腔生物PCD從滅菌器中 取出，生物指示物應(yīng)放置56°C±2°C培養(yǎng)7d(或遵循產(chǎn)品說明書），觀察培養(yǎng)結(jié)果。并設(shè)陽性對照和陰 性對照（自含式生物指示物不用設(shè)陰性對照）。
滅菌非管腔器械時，應(yīng)使用非管腔生物監(jiān)測包進行監(jiān)測，應(yīng)將生物指示物置于紙塑包裝袋內(nèi)，密封 式包裝后，放置于滅菌器內(nèi)最難滅菌的部位(按照生產(chǎn)廠家說明書建議，遠離甲醛注人口）。滅菌周期完 成后立即將非管腔生物監(jiān)測包從滅菌器中取出，生物指示物應(yīng)放置56C±2C培養(yǎng)7d(或遵循產(chǎn)品說 明書），觀察培養(yǎng)結(jié)果。并設(shè)陽性對照和陰性對照（自含式生物指示物不用設(shè)陰性對照）。
E.4結(jié)果判定
陽性對照組培養(yǎng)陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，實驗組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽性對照組培養(yǎng) 陽性，陰性對照組培養(yǎng)陰性，實驗組培養(yǎng)陽性，判定為滅菌失敗；同時應(yīng)進一步鑒定實驗組陽性的細菌是 否為指示菌或是污染所致。
